জন্মগত মেলানোসাইটিক নেভাসের প্যাথোজেনিক রূপগুলির জন্য লক্ষ্যযুক্ত রাইবোনিউক্লিক অ্যাসিড থেরাপি

সম্প্রতি প্রকাশিত এক গবেষণায় ড জার্নাল অফ ডার্মাটোলজি রিসার্চগবেষকরা প্যাথোজেনিক NRAS c.181C>কনজেনিটাল মেলানোসাইটিক নেভি (CMN) এ মিউটেশনকে লক্ষ্য করার জন্য একটি জিন থেরাপির পদ্ধতি তৈরি করেছেন, ছোট হস্তক্ষেপকারী রাইবোনিউক্লিক অ্যাসিড (siRNA) ব্যবহার করে এর প্রকাশকে বাধা দিতে এবং ক্ষত ক্লিয়ারেন্স প্ররোচিত করে।

অধ্যয়ন: অনকোজেনিক এনআরএএস-চালিত নেভির চিকিত্সার জন্য আরএনএ থেরাপি অ্যাপোপটোসিসকে প্ররোচিত করেছবি উৎস: Stock-Asso/Shutterstock.com

পটভূমি

আরএএস প্রোটিন কোষ বিভাজন, পার্থক্য এবং অ্যাপোপটোসিস প্রক্রিয়ার জন্য গুরুত্বপূর্ণ। অনকোজেনিক RAS ভেরিয়েন্টগুলি ক্যান্সার সৃষ্টি করে কিন্তু থাইরয়েড নোডুলস, কোলন পলিপ এবং মেলানোসাইটিক নেভির মতো সৌম্য ক্ষত সৃষ্টি করে।

এই ক্ষয়ক্ষতিগুলোকে বিপরীত করলে ক্যান্সারের প্রকোপ কমতে পারে, কিন্তু ডাউনস্ট্রিম সিস্টেমের ইনহিবিটার ব্যবহার করে এর প্রভাব মোকাবেলা করা কঠিন। গুরুতর CMN শিশুদের মধ্যে অসুস্থতা এবং মৃত্যুর একটি প্রধান কারণ।

এনআরএএস c.181C>A, p.(Q61K) প্যাথোজেনিক বৈকল্পিককে লক্ষ্য করা রোগের স্থায়ী পথ সনাক্ত করার জন্য একটি কার্যকর নির্ভুল ঔষধ কৌশল হতে পারে।

গবেষণা সম্পর্কে

এই গবেষণায়, গবেষকরা ক্ষত নিরাময়ের জন্য এবং ক্যান্সার প্রতিরোধের জন্য একটি থেরাপিউটিক পদ্ধতি প্রদান করতে সিএমএন-এর বৈকল্পিক অ্যালিলকে লক্ষ্য করে siRNA তৈরি করেছেন।

গবেষকরা সিএমএন সহ আটটি শিশুর সিএমএন নেভাস কোষগুলিকে সংস্কৃতি করেছেন এবং সুই বায়োপসি বা অস্ত্রোপচারের মাধ্যমে ত্বকের নমুনাগুলি পেয়েছেন। তারা মানুষের কলোরেক্টাল ক্যান্সার (HCT116) কোষে উন্নত এবং অপ্টিমাইজ করা siRNA ব্যবহার করেছে।

তারা স্ট্যাক ইমেজিং ব্যবহার করে বিচ্ছিন্ন প্রাথমিক CMN নেভাস কোষের চারটি ব্যক্তির মধ্যে নেভাস কোষের রূপবিদ্যা এবং আচরণ বিশ্লেষণ করতে এবং তাদের বহুমুখী কোষ, বাইপোলার কোষ, ননপোলার কোষ এবং বড় মাল্টিনিউক্লিয়েটেড সম্ভবত সেন্সেন্ট কোষে শ্রেণীবদ্ধ করতে মেশিন লার্নিং ব্যবহার করে। উপরন্তু, তারা ফ্লো সাইটোমেট্রি এবং ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি বিশ্লেষণ করেছে।

গবেষকরা ভিভো অ্যাপোপটোসিস পরীক্ষায় সঞ্চালিত এবং সিলিকো অ্যালিল কলিংয়ের জন্য সিআরএনএ প্রার্থীদের মূল্যায়ন করতে দুটি সমীকরণ ব্যবহার করেছেন। তারা ওয়েস্টার্ন ব্লট বিশ্লেষণের পরে পরিমাণগত পলিমারেজ চেইন প্রতিক্রিয়া (পিসিআর) সঞ্চালন করে।

তারা পেয়ার করা C6072C এবং C8052C-WT কোষে siRNA 1, 8, এবং 15 ছাড়া সম্পূর্ণ-ট্রান্সক্রিপ্টোম RNA সিকোয়েন্সিং সঞ্চালন করেছে। তারা নেতৃস্থানীয় siRNA প্রার্থী siNRAS পরীক্ষা করেছে^{Q61 সিরিজ}, প্রাথমিক রোগীর কোষে।তারা siNRAS এর একক ডোজ দিয়ে নেভাস কোষের চিকিত্সা করেছিল^{Q61 সিরিজ} এবং 48 ঘন্টা পরে ফলাফল পরীক্ষা করুন.

ভিভো ডেলিভারিতে মূল্যায়ন করার জন্য, গবেষকরা রিসেপ্টর-টার্গেটেড ন্যানো পার্টিকেলস (RTNPs) এ এনক্যাপসুলেটেড Cy5-লেবেলযুক্ত কন্ট্রোল siRNA সহ Tyr:NRAS ইন্ট্রাডার্মালি ইনজেকশন করেছেন।^{Q61 সিরিজ} মাউস ডার্মিস।তারা siNRAS এর আগে এবং পরে প্রাথমিক নেভাস কোষগুলিতে আরএনএ সিকোয়েন্সিং সঞ্চালন করেছিল^{Q61 সিরিজ} অন- এবং অফ-টার্গেট প্রভাব মূল্যায়নের জন্য চিকিত্সা।

গবেষকরা এন্ডোপ্লাজমিক রেটিকুলাম (ER) স্ট্রেস-প্ররোচিত অ্যাপোপটোসিস নিয়ন্ত্রকদের অভিব্যক্তি অধ্যয়ন করেছেন, যার মধ্যে এন্ডোপ্লাজমিক রেটিকুলাম থেকে নিউক্লিয়াস সিগন্যালিং 1 (ERN1), ইউক্যারিওটিক ট্রান্সলেশন ইনিশিয়েশন ফ্যাক্টর 2-আলফা কিনেস 3 (EIF2AK3), সক্রিয় ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টর 4 (ATF4), (ATF4)। ATF6) এবং গ্লুকোজ-নিয়ন্ত্রিত প্রোটিন 78 (GRP78)।

গবেষকরা তুলনীয় লক্ষ্য ক্রম সহ জিন পরীক্ষা করেছেন এবং পথ বিশ্লেষণ করেছেন। তারা ইনট্রাভিটাল ইমেজিংয়ের সাত দিনের মধ্যে চারটি নেভাস রোগীর অ্যাপোপটোসিস মূল্যায়ন করতে ক্যাসপেস-3/7 অ্যাক্টিভেশন ব্যবহার করেছিল।

তারা siNRA তুলনা করেছে^SQ61K চিকিত্সা প্রভাব মাইটোজেন সক্রিয়করণ প্রোটিন কাইনেজ ইনহিবিটার (MEKi) trametinib, একমাত্র ড্রাগ থেরাপি যা CMN রোগীদের পরীক্ষা করা হয়।

ফলাফল

এই গবেষণাটি দেখায় যে siRNA একটি পুনরাবৃত্ত প্যাথোজেনিক বৈকল্পিককে লক্ষ্য করে মেলানোসাইটিক নেভিতে অনকোজেনিক এবং বর্তমানে অচিকিৎসাযোগ্য NRASQ61K কে উল্লেখযোগ্যভাবে দমন করে।

siRNA চিকিত্সা ADP-ribosylation ফ্যাক্টর (Arl)-এর মতো প্রোটিন 6 ইন্টারেক্টিং প্রোটিন 1 (ARL6IP1) এর মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেছে, ER স্ট্রেস-প্ররোচিত অ্যাপোপটোসিসের একটি সু-প্রতিষ্ঠিত প্রতিরোধক যা পূর্বে NRAS-এর সাথে যুক্ত ছিল না।

siRNA কে টার্গেট করার প্যাকেজিং স্ব-একত্রিত siNRAS-এ^{Q61 সিরিজ}-RTNPs siRNA এর অবক্ষয় রোধ করে, মানবীকৃত মাউস মডেলে টার্গেট siRNA সফলভাবে ডেলিভারি সক্ষম করে এবং মানুষের ত্বক এক্সপ্লান্ট প্রশাসনের অনুমতি দেয়।

RTNPs বেছে বেছে ভিভোতে নকডাউন ভেরিয়েন্ট হিউম্যানাইজড এনআরএএস, আরএএস-চালিত সৌম্য টিউমারগুলিতে ক্লিনিকাল ট্রায়ালের সম্ভাবনাকে সমর্থন করে।

প্রাথমিক কোষে, siRNA এর একটি ডোজ একটি অ্যাপোপটোটিক ক্যাসকেডকে প্ররোচিত করে যা MEK ইনহিবিটর চিকিত্সা থেকে আলাদা। HCT116 কোষে RNAseq-এ SiRNA8-এর ন্যূনতম অফ-টার্গেট প্রভাব রয়েছে।

প্রাথমিক CMN কোষ সংস্কৃতিতে, siNRAS^{Q61 সিরিজ} প্রচলিত মেলানোসাইট মার্কারগুলিকে প্রভাবিত না করে বৈকল্পিক প্রতিলিপিগুলির উত্পাদনকে দমন করে এবং এনআরএএস বৈকল্পিক অ্যালিল এমআরএনএ স্তর হ্রাস করে।

ট্রান্সক্রিপ্টোম বিশ্লেষণ ERN1-তে উল্লেখযোগ্য বৃদ্ধি প্রকাশ করেছে, অনুরূপ পথের একটি মূল খেলোয়াড়। যাইহোক, ER-সম্পর্কিত স্ট্রেস সম্পর্কিত অন্যান্য জিনের অভিব্যক্তি, যেমন ATF-4, 6, GRP78, এবং EIF2AK3, পরিবর্তন করা হয়নি, ইঙ্গিত করে যে ER স্ট্রেস siNRASQ61K চিকিত্সা দ্বারা প্ররোচিত অ্যাপোপটোসিসের প্রধান কারণ নয়।

গবেষকরা খুঁজে পেয়েছেন যে এনআরএএস-চালিত মেলানোসাইটিক নেভির বেঁচে থাকার জন্য অ্যাপোপটোসিস থেকে সুরক্ষা গুরুত্বপূর্ণ, এবং অ্যালিল-নির্দিষ্ট siRNA-এর সাথে চিকিত্সা এই সুরক্ষাটি বাতিল করেছে। এই অনুসন্ধান ক্যান্সার প্রতিরোধের ভিত্তি তৈরি করতে পারে, বিশেষ করে উচ্চ-ঝুঁকিপূর্ণ গোষ্ঠীগুলিতে।

siRNA টার্গেট করা অ-ম্যালিগন্যান্ট টিউমারগুলির জন্য RAS-চালিত চিকিত্সাগুলির গবেষণার ভিত্তি হয়ে উঠতে পারে, ব্যক্তিদের মধ্যে CMN রিগ্রেশনের সম্ভাব্যতা প্রদর্শন করে এবং অনকোজেনিক RAS দ্বারা সৃষ্ট সৌম্য টিউমারগুলির প্রতিরোধমূলক ক্যান্সারের চিকিত্সার জন্য একটি দৃষ্টান্ত প্রদান করে।

গবেষণায় ডোজ কমানোর জন্য বৈকল্পিক অ্যালিল-নির্দিষ্ট থেরাপি এবং রিসেপ্টর-টার্গেটেড থেরাপির সুপারিশ করা হয়েছে। ট্রামেটিনিব চিকিত্সার এক দিনের মধ্যে সিএমএন কোষের বৃদ্ধি হ্রাস করেছিল কিন্তু সময়ের সাথে সাথে অ্যাপোপটোসিসকে প্ররোচিত করেনি, হয় একা বা siRNA নিয়ন্ত্রণের সাথে।